【单克隆抗体制备原理】单克隆抗体（Monoclonal Antibody, mAb）是由单一B细胞克隆产生的、针对特定抗原表位的抗体。其制备过程结合了细胞融合技术与筛选方法，能够高效、稳定地获得高特异性、高亲和力的抗体。该技术由Köhler和Milstein于1975年首次成功实现，为免疫学、医学及生物技术领域带来了革命性的突破。
一、单克隆抗体制备的基本原理
单克隆抗体的制备基于以下核心原理：
1. 抗原刺激：将特定抗原注入动物体内，激活B淋巴细胞。
2. 细胞融合：将免疫后的B细胞与骨髓瘤细胞进行融合，形成杂交瘤细胞。
3. 筛选与克隆：通过选择性培养基筛选出成功的杂交瘤细胞，并对其进行克隆化。
4. 抗体检测：对克隆化的杂交瘤细胞进行抗体分泌能力的检测与分析。
5. 大规模生产：筛选出高效、稳定的杂交瘤细胞后，进行体外或体内培养以获得大量单克隆抗体。
二、单克隆抗体制备流程总结
| 步骤 | 操作内容 | 目的 |
| 1 | 抗原免疫动物 | 激活B细胞产生特异性抗体 |
| 2 | 分离脾脏B细胞 | 获得具有抗原识别能力的B细胞 |
| 3 | 骨髓瘤细胞培养 | 提供无限增殖能力的细胞来源 |
| 4 | 细胞融合 | 形成既能增殖又能分泌抗体的杂交瘤细胞 |
| 5 | 选择性培养 | 筛选出杂交瘤细胞，淘汰未融合细胞 |
| 6 | 克隆化培养 | 获得单一克隆的杂交瘤细胞 |
| 7 | 抗体检测 | 筛选高亲和力、特异性强的杂交瘤细胞 |
| 8 | 大规模培养 | 生产大量单克隆抗体用于应用 |
三、关键点说明
- 单克隆性：每个杂交瘤细胞来源于一个B细胞，因此只能分泌一种特异性抗体。
- 稳定性：骨髓瘤细胞的加入使得杂交瘤可以无限增殖，保证抗体的持续供应。
- 特异性：通过抗原免疫和筛选，确保抗体针对目标抗原的特定表位。
- 可重复性：一旦获得稳定杂交瘤，即可长期保存并重复使用。
四、应用与意义
单克隆抗体因其高度特异性，在疾病诊断、治疗（如肿瘤靶向治疗）、生物检测等领域广泛应用。此外，该技术也为后续的基因工程抗体（如人源化抗体、双特异性抗体等）奠定了基础。
通过以上流程，单克隆抗体制备实现了从基础研究到实际应用的跨越，成为现代生物医学的重要工具之一。
